Kedves Hallgatók!
A feltöltésre kerültek a Sejtkultúrák további gyakorlati jegyzetei: Sejttenyésztés Time-Lapse mikroszkópia, Fluoreszcens mikroszkópia is.
Tisztelt Hallgatók!
A Sejtkultúrák 2019-es gyakorlati jegyzetek itt letölthetők.
Üdv: Gyakorlatvezetők
Áttörést értek el az élő sejtek megfigyelésében a Debreceni Egyetem kutatói. A tudósok egy olyan egyedülálló videómikroszkópos rendszert építettek, melynek használata új távlatokat nyit a rákkutatásban és a farmakológiában is.
Sehol a világon nem tudták még olyan sokáig és olyan sokszor lefotózni az élő sejteket, mint a Debreceni Egyetemen. Egy egyedi építésű négy videómikroszkópból álló rendszerrel 28 napon keresztül figyelték és percenként fotózták a sejtek szövetté válásának folyamatát. Más mikroszkópos módszerekkel mindössze néhány óráig, vagy legfeljebb néhány napig lehet vizsgálni mesterségesen tenyésztett sejteket.
Tisztelt Hallgatók!
A gyakorlathoz szükséges jegyzetek letölthetők: Képanalízis, Fluoreszcens mikroszkópia, Sejttenyésztés, Time-lapse mikroszkópia, Balesetvédelem.
Üdvözlettel: a gyakorlatok vezetői.
http://hirek.unideb.hu/hu/hir/20170405_szenzacios-ujdonsag-sejtkutatasban
A külvilágból beérkező információk jelentős hányadát a látás révén érzékeljük. A szemünk kitüntetett szerepet kap az érzékszerveink között, nem véletlenül gyakori a szemünk fénye szófordulat. A szaruhártya egyik leggyakoribb, fájdalmas sérülése a felszín felkarcolódása. A szemészeti gyakorlatban ilyen esetben antibiotikum-terápiát javasolnak, melynek fő célja a viszonylag hosszan tartó regeneráció során a szem végelme a fertőzésekkel szemben. Az antibiotikumok kórokozókra gyakorolt növekedés gátló hatása vetette fel a kutatásaink alapkérdését, ami szerint: Érvényesül-e ez a hatás az emberi sejteken is, és ha igen, milyen mértékben?
A vizsgálataink során létrehoztunk egy szaruhártya eredetű sejtekből álló a szaruhártya gyógyulását reprezentáló modellt, melyen teszteltük a szemészeti gyakorlatban alkalmazott antibiotikumok (klóramfenikol, és rifampicin) hatását. A vizsgálataink során a teljes regenerációs folyamatot közeli infravörös videómikroszkópos rendszerrel rögzítettük, egy perces időbeni felbontásban, a felvételeket a regeneráció befejeződéséig, illetve a sejtek pusztulásáig folytattuk. A szaruhártya gyógyulási modelljében az összefüggő sejtpázsitot felkarcoltuk, és a karc záródását videómikroszkópos rendszerrel követtük nyomon. Az antibiotikumok hiányában a regeneráció gyorsan végbement, míg az antibiotikumok jelenlétében az alacsonyabb terápiás koncentráció mellett a regeneráció elhúzódott, a magasabb dózis jelenléte viszont már a sejtek pusztulásához vezetett, vagyis a regeneráció nem fejeződött be.
Az elvégzett vizsgálatok eredményei arra utalnak, hogy az antibiotikumok jelenléte a szaruhártya regenerációja során káros hatású a sejtekre, azonban megjegyzendő, hogy az antibiotikumok hiányában akár látásvesztéssel járó fertőzések is kialakulhatnak. Az eddigi eredmények fényében javasolható ezen antibiotikumok körültekintő, óvatos, és indokolt használata. Turáni Melinda, doktorandusz
Families in USA buy more medicines per person than any other area. The availability of remedies provided by companies is certainly a contributing matter to prescription therapy abuse epidemic. Many patients already know that medications are made to treat health problems, but they can hurt us if taken incorrectly. Cialis is a well-known generic used to treat disability to get or keep an erection. Topics such as "how to get a free trial of viagra" or "generic name for viagra" are very pop now. Perhaps you already heard about it. What scientists talk about "what is the generic name for viagra"? Other question we should is "healthy man viagra". Sometimes men who take street drugs like marijuana find it awkward to get an erection and turn to prescription drugs for a temporary solution. Additionally there are various unproven herbal medicines for erectile dysfunction.
A gadolínium kötött formáját MRI vizsgálatok során alkalmazzák kontrasztanyagként. Az ágens normális esetben nem okoz problémát, azonban előfordulhat, hogy komplexéből kiszabadult szabad Gd3+ ionok kerülhetnek a szervezetbe, melyek főleg a betegek, a kisgyermekek és az idősek számára jelentenek veszélyt. Emiatt dialízises betegeknél csak a legszükségesebb esetben alkalmazhatók gadolínium tartalmú kontrasztanyagok, és a vizsgálat után közvetlenül dialízisnek kell alávetni a beteget, hogy azonnal eltávolítsák szervezetéből a káros anyagot. A gadolínium komplexéből kiszabadulva lerakódik a szervezetben, főleg a májban, lépben, tüdőben és a mellékvesében halmozódik fel. A kísérletek során arra kérdésre kerestük a választ, hogy sejtek szintjén milyen elváltozásokat okozhat a szabad Gd3+ ion, hogy különböző sejttípusok vajon eltérő módon és mértékben reagálnak-e a gadolínium-kloriddal végzett kezelésekre, illetve milyen specifikus változásokat okoz ennek az anyagnak eltérő koncentrációkban történő alkalmazása.A vizsgálat során többek között Time-Lapse Imaging videomikroszkópos módszert használtunk a gadolínium-klorid toxicitásának megfigyelésére. Ez az eljárás lehetőséget biztosított számunkra a kontroll és a különböző Gd3+ koncentrációkkal kezelt sejtek viselkedésének percenkénti felbontásban történő vizsgálatára. A videók (humán vastagbél és egér laphám tumor sejtek) kontroll, 0.75 és 1.5 μM GdCl3-dal kezelt tenyészetekről készültek. Feltételeztük, hogy egyes tenyészetek esetében a koncentráció és az idő befolyásolja a GdCl3 károsító hatásának mértékét. A felvételek összehasonlítása után látható, hogy a gadolínium mennyisége valóban befolyásolja a sejtek pusztulásának mértékét; illetve a sejtek tenyésztő edényhez történő rögzülése minden sejttípus és minden gadolínium koncentráció esetében a kezelést követően szinte azonnal megtörténik. Mindezek alapján javasolható a gadolinium jövőbeni körültekintő alkalmazása.
Kiss Alexandra
biomérnök hallgató
Families in USA buy more medicines per human than any other area. The availability of remedies provided by companies is certainly a contributing matter to prescription medication abuse epidemic. Many patients already know that medications are made to treat health problems, but they can detriment us if taken incorrectly. Cialis is a well-known generic used to treat inability to get or keep an hard-on. Topics such as "how to get a free trial of viagra" or "generic name for viagra" are very pop now. Perhaps you already heard about it. What scientists talk about "what is the generic name for viagra"? Other question we must is "healthy man viagra". Sometimes men who take street drugs like marijuana find it awkward to get an erection and turn to prescription drugs for a temporary solution. Additionally there are various unproven herbal medicines for erectile disfunction.
A sejtek osztódási ciklusaiban az örökítőanyag különböző formákat vesz fel annak érdekében, hogy a benne tárolt információk a legkevésbé sérüljenek. Ezt kromatin kondenzálódásnak nevezzük, mely egy sok tényező által meghatározott folyamat, ami kulcsfontosságú a sejtosztódás során.
A kondenzálódás végső (közvetlenül osztódás előtti) formája a kromoszómák.
Kutatásunk arra irányult, hogy az arany nanorészecskék befolyásolják-e a kromoszómák kialakulásának folyamatát és így a sejtosztódást.
Fluoreszcens mikroszkópos és Time- Lapse Imaging vizsgálatokat végeztünk arany nanorészecskével kezelt humán limbális sejteken (HuLi).
A HuLi egy különleges sejt típus, mely a szaruhártya sérülése esetén a sebgyógyulásért felelős.
Tehát különböző anyagok, melyek hatással vannak a kromatin kondenzálódásra, befolyásolják a sérülés gyógyulási idejét, minőségét.
Vizsgálataink alapján megállapítottuk, hogy az arany nanorészecskék gátolják a kromoszómák kialakulását a sejtmagban és lassítják a sebgyógyulást.
Fluoreszcens mikroszkóppal végzett vizsgálatok szerint a kezeletlen (kontroll) mintákhoz képest csak kis számban, vagy egyáltalán nem jelentek meg kromoszómák az arany nanorészecskékkel kezelt minták esetében.
Time- Lapse Imaging videomikroszkópos rendszerrel készített felvételeken jól vizsgálható a sebgyógyulás folyamata, úgynevezett karcodelleken.
Az alábbi videón látható, hogy a megkarcolt sejtpázsit hogyan gyógyul be. Továbbá az is megfigyelhető, hogy minél magasabb koncentrációjú arany nanorészecskéket tartalmazó kezelést kaptak a tenyészetek, annál lassabb a teljes regeneráció.
Tehát összességében a vizsgálataink alapján az feltételezhető, hogy az arany nano részecskék negatív hatással lehetnek a sejtek osztódására és a seb gyógyulására.
Barna Beatrix
biológus hallgató
Families in USA buy more medicines per man than any other area. The availability of remedies provided by companies is certainly a contributing matter to prescription curing abuse epidemic. Many patients already know that medications are made to treat health problems, but they can hurt us if taken incorrectly. Cialis is a well-known generic used to treat inability to get or keep an erection. Topics such as "how to get a free trial of viagra" or "generic name for viagra" are very popular now. Perhaps you already heard about it. What scientists talk about "what is the generic name for viagra"? Other question we should is "healthy man viagra". Sometimes men who take street drugs like marijuana find it awkward to get an erection and turn to prescription drugs for a temporary solution. Additionally there are various unproven herbal medicines for erectile disfunction.
Az emberek egyre több alternatív módszert próbálnak ki egészségük megőrzésének érdekében. Manapság az egyik legelterjedtebb lehetőség erre az ezüst kolloid használata. Az ezüstnek ismert háztartásbeli, ipari és kozmetikai elterjedése, azonban egészségügyi alkalmazásának megbízhatóságával kapcsolatban komoly kétségek merültek fel, ezért kutatócsoportunk ennek az anyagnak a sejtjeinkre gyakorolt hatásait vizsgálta.
Kísérleteink során emberi szemből izolált, a hámhiány pótlásában fontos szerepet betöltő, úgynevezett Humán Limbális (HuLi) sejteket kezeltük ezüst kolloiddal. A sejttenyészetet karcmodellként alkalmaztuk a szem sérülésének bemutatására; majd azt vizsgáltuk, hogy milyen hatásuk van az ezüst részecskéknek a sebgyógyulásra.
Megfigyeléseinknél többféle módszert is használtunk a kontroll - azaz nem kezelt, normál tenyésztési körülmények között fenntartott-, és a két eltérő koncentrációjú ezüst kolloiddal kezelt sejtkultúrák esetében.
Ahhoz, hogy a vizsgált anyag sejtekre gyakorolt hatásait nyomon követhessük, a sejteket Long-Term Scan mikroszkópos megfigyelés alatt tartottuk és számítógéppel vezérelt kamerák segítségével percenként felvételeket is készítettünk róluk.
Az ezüst kolloid hatására a sejtjeinkben található kromoszómák szerkezetében végbemenő változásokat pedig fluoreszcens mikroszkóp segítségével vizsgáltuk.
Egyre több szakirodalomban olvashatunk az ezüst részecskék előnyei mellett azok káros hatásairól is. Kutatásunkból kiderült, hogy az ezüst kolloid annál jobban lassította a sebek gyógyulását, minél nagyobb mennyiségben alkalmaztuk. Továbbá a kromoszóma szerkezetek kialakulását gátolta és kis mértékben alaki elváltozásukat okozta.
Ezen tapasztalatok alapján arra a következtetésre jutottunk, hogy az ezüst kolloid fenntartásokkal kezelendő anyag, melynek hatásairól érdemes további vizsgálatokat készíteni.
Baksa Viktória
Biomérnök hallgató
Families in USA buy more medicines per human than any other area. The availability of remedies provided by companies is certainly a contributing question to prescription therapy abuse epidemic. Many patients already know that medications are made to treat health problems, but they can injury us if taken incorrectly. Cialis is a well-known generic used to treat failure to get or keep an erection. Topics such as "how to get a free trial of viagra" or "generic name for viagra" are very popular now. Perhaps you already heard about it. What scientists talk about "what is the generic name for viagra"? Other question we should is "healthy man viagra". Sometimes men who take street drugs like marijuana find it awkward to get an erection and turn to prescription drugs for a temporary solution. Additionally there are various unproven herbal medicines for erectile dysfunction.
A 21. századi orvostudomány a gombás fertőzések jelentős részét hathatósan azonosítja rövid idő alatt. A fertőzések kialakulásának módja azonban már sokkal bonyolultabb kérdéseket vet fel. A testünkben élő gombák természetes módon jelen vannak a szervezetben. A nemi traktusban, a bélben, a szájban, a nyelőcsőben és a torokban is megtalálhatók, és nem okoznak semmilyen problémát, hiszen teljes harmóniában élnek együtt a szervezetünkkel.Egészen addig, amíg az immunrendszer valamilyen okból meg nem gyengül, és a gombael nem szaporodik.
Ilyenkor azonban teljesen érthetetlen és összefüggéstelen panaszokat okoz, és túlzott elburjánzása súlyos betegségekhez vezethet. Az elszaporodott gombák az egyén életére azonnali és közvetlen negatív hatással vannak.
Egyes statisztikai adatok szerint ma már minden negyedik ember szenved valamilyen gombásodásban, ráadásul az esetek növekvő száma, az elváltozások kiterjedése és súlyossága is egyre aggasztóbb. A gombás betegségek kezelése, különösen, ha már nem friss a fertőzés, nagyon nehéz, és orvostól, betegtől egyaránt sok türelmet kíván. Éppen ezért érdemes fokozott figyelmet fordítani a megelőzésre, a gyors kivizsgálásra, illetve feltérképezni a gombák támadási stratégiáit.
A Candida gombák nemzetségéhez számos faj tartozik, melyek közül leggyakrabban a Candida albicans (C.albicans) okoz humán megbetegedést. A gombák elleni hathatós védekezés egyik legfontosabb eszköze, ha megtudjuk, milyen módon szaporodnak, hogyan támadnak a szervezetünkben.
Ebben a kutatásban a nagy felbontású video mikroszkópos technikát a digitális képelemzéssel kombinálva arra használtuk, hogy megvizsgáljuk különböző gombaellenes szerek hatását a Candida albicans növekedési és letapadási dinamikájára. Olyan gombaellenes szereket vizsgáltunk, mint az Amfotericin- B és a Flukonazol, melynek gombaölő hatása már bizonyított. Fel akartuk mérni azt, hogy ezek a szerek hogyan befolyásolják a Candida albicans letapadását, spórázási illetve hifa növekedési képességét.
Vizsgálatunkból kiderült, hogy olyan gombaellenes szerek, mint a flukonazol, kis mértékben gátolják a gomba szaporodását, míg az amphotericin- B gátolja a gombák hifázását, ezáltal gátolja a növekedésüket is.
Ezek a vizsgálatok dinamikusan dokumentálják, hogy a C. albicans mutáns törzsei drámai morfológiai változásokon mennek keresztül, és azt mutatják, hogy az általunk továbbfejlesztett time-lapse módszer lehet az egyik legérzékenyebb vizsgálati módszer az ilyen irányú vizsgálatokra.
Families in USA buy more medicines per man than any other area. The availability of remedies provided by companies is certainly a contributing matter to prescription medication abuse epidemic. Many patients already know that medications are made to treat soundness problems, but they can injury us if taken incorrectly. Cialis is a well-known generic used to treat disability to get or keep an erection. Topics such as "how to get a free trial of viagra" or "generic name for viagra" are very popular now. Perhaps you already heard about it. What scientists talk about "what is the generic name for viagra"? Other question we must is "healthy man viagra". Sometimes men who take street drugs like marijuana find it awkward to get an erection and turn to prescription drugs for a temporary solution. Additionally there are various unproven herbal medicines for erectile disfunction.